品名：GenXion® Transfection Reagent 2000

貨號：GXL2000 

規格：1ml 

價格：￥600元

產品簡介

GenXion® Transfection Reagent 2000是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑。適合于將核酸(DNA 和RNA)轉染入真核細胞，具有低細胞毒性；對多種類型的細胞和培養板都具有高轉染效率；轉染時血清的存在不影響轉染效率的優點。

適用范圍: 貼壁細胞和懸浮細胞（晡乳動物細胞系）的轉染。

保存條件

4-8℃ 保存一年。（避免冷凍）

質粒DNA的轉染

對大多數細胞來說，DNA(μg)與GenXion® Transfection Reagent 2000 (μl)的比例為 1:2~1:3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平，并能減少細胞毒性。

1. 以24 孔板為例

貼壁細胞：轉染 diyitian ，用500 μl 不含 kangshengsu 的培養基接種0.5?2X105  細胞，使之 diertian 能達到70-90%匯合。

懸浮細胞：在準備DNA-GenXion® 復合物之前，用500 μl 不含 kangshengsu 的培養基接種4?8X105  細胞即可。

2. 對每個轉染樣品，進行以下操作

a. 在Eppendorf 管里分別加入50 μl 〇pti-MEM I Reclipped Serum Medium 和0.8 μg DNA 輕柔混勻，制成DNA 稀釋液。

b. 在另一個Eppendorf 管里分別加入50μl OpTi-MEMI Reclipped Serum Medium 和2.0 μl GenXion®(注意用前先混勻)，輕柔混勻制成GenXion® 稀釋液，室溫靜置5 分鐘。

c. 將DNA稀釋液和GenXion® 稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置20 分鐘，形成DNA-GenXion® 復合物。DNA-GenXion® 復合物在室溫下可穩定存在6 小時。

3. 將DNA-GenXion®  復合物加入到接種好的細胞中，將培養板輕輕地前后搖動，使復合物分散均勻。

4. 在37C CO2 培養箱中培養4-6 小時后更換培養基，繼續培養18?48 小時。

5. 如果要篩選穩定細胞株，則在轉染24 小時后將細胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養基中，diertian 加入選擇性培養基進行篩選。

質粒DNA轉染的優化

為達到 zuigao 的轉染效率和降低細胞毒性的影響，可以對DNA和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例以及細胞密度進行優化，一般在1:0.5?1:5 的范圍內優化 DNA (μg)和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例。